Лабораторная диагностика урогенитального хламидиоза
Техника взятия материала: одним из самых ответственных этапов диагностики хламидиоза является забор
материала. Оптимальными для персистенции Ch. trachomatisи его интенсивного размножения являются
определенные участки цилиндрического эпителия мочеполовых путей (передняя уретра на глубине 2,5—4,0
см у мужчин).
В отличие от принципа забора материала при других передающихся половым путем инфекциях
больному не следует рекомендовать длительную задержку мочеиспускания. Головку полового члена в
области наружного отверстия уретры обрабатывают ватным тампоном, смоченным в изотоническом растворе
хлорида натрия. При наличии отделяемого первую каплю свободно стекающих выделений, появляющуюся при
надавливании на уретру, удаляют.
Лабораторная диагностика хламидиоза до настоящего времени сложна. Наиболее часто применяют
следующие методы диагностики:
1.Цитологическое исследование окрашенных препаратов по методу Романовского—Гимзы. При этом
методе элементарные тельца хламидии окрашиваются в розовый цвет, а ретикулярные тельца — от голубого до
синего. Ядра клеток имеют вишневый оттенок, цитоплазма нежно-голубая. Таким методом можно обнаружить
хламидии только у 15—20%, так как из-за малых размеров возбудителя можно выявить только хламидийные
включения, а не отдельные микроорганизмы.
2. Прямой иммунофлюоресцентный (ПИФ) метод является основой лабораторной диагностики хламидийной
инфекции, базирующейся на использовании моноклональных антител, меченных флюоресцеинизотиоционатом.
При этом можно выявлять внеклеточно расположенные тельца хламидии непосредственно в месте взятия
материала.
3. В последние годы в широкую практику стали внедряться наиболее современные методы молекулярной
диагностики, к которым относят полимеразную цепную реакцию (ПЦР), лигазную цепную реакцию (ЛЦР), метод
транскрипционного анализа,, ДНК-зонды. Из всех методов молекулярной диагностики в России наиболее
распространена ПЦР. Этот метод основан на том, что в исследуемый образец вносятся заранее
синтезированные нуклеотидные последовательности (праймеры), комплементарные генетическому,
материалу исследуемого возбудителя. Такие праймеры способны комплементарно взаимодействовать с
геномной ДНК искомого инфекционного агента. При температурной обработке исследуемой пробы
двуспиральная ДНК денатурирует и становится доступной взаимодействию праймеров, комплементарных
определенной зоне геномной ДНК. В результате повторных циклов денатурации ДНК происходит
избирательная амплификация того ее участка, который задается используемыми праймерами. Этим методом
достигается высокоспецифическая детекция генетического материала возбудителя. Специфичность и
чувствительность ПЦР превосходят все другие методы диагностики, включая культуральную (изоляция на
культуре клеток), считавшуюся до последнего времени золотым стандартом при исследовании
хламидии.
4. Изоляция возбудителя в культуре клеток. Лучшим методом диагностики хламидийных поражений является
изоляция возбуди- теля в культуре клеток, обработанных антиметаболитами (цикло-гексимидин, цитохолазин В,
декстран). Для выделения хламидий чаще используют линию клеток Мак-Коя или L-929. Такой метод диагностики очень
трудоемкий и требует не менее 5 сут. для получения результатов. Культуральная диагностика необходима в
процессе оценки динамики лечения, особенно при решении вопроса о персистенции хламидий, а также в
научных целях.
5. Одним из перспективных методов серодиагностики хламидиозов является вариант
иммуноферментного метода — микрометод EHISA, который значительно более чувствителен, чем РСК.
